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                                    檸檬酸水解三七莖葉皂苷的意義，為什么百草枯中毒要用檸檬酸洗胃
        
    
    
    

    

    

    
    
        
    
            
    檸檬酸水解三七莖葉皂苷的意義，為什么百草枯中毒要用檸檬酸洗胃
    

            
    
                發布時間：2023-06-13 03:19
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                    本文目錄一覽為什么百草枯中毒要用檸檬酸洗胃2，三七總皂苷與三七葉總皂苷功效區別謝謝3，喝過中藥后能喝檸檬水解苦嗎4，三七的莖葉花有什么功能5，改良LOWRY比色法與酚試劑法在原理上的不同6，溶液中鈮的測定7，舉例說明細菌分解代謝產物在細……
                
    
            
    

            
    



                
    本文目錄一覽
    1，為什么百草枯中毒要用檸檬酸洗胃
    

    酸堿中和一下，減少傷害
    檸檬酸水解三七莖葉皂苷的意義
    

    2，三七總皂苷與三七葉總皂苷功效區別謝謝
    

    






你好，都是三七的提取物，三七總皂苷具有活血化瘀，消腫止痛的作用，而三七葉總皂苷具有補血強身，養血安神，擴張冠狀動脈作用。望采納


    檸檬酸水解三七莖葉皂苷的意義
    

    3，喝過中藥后能喝檸檬水解苦嗎
    

    半小時后服用。
    不可以的,會影響藥效
    檸檬酸水解三七莖葉皂苷的意義
    

    4，三七的莖葉花有什么功能
    

    







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    5，改良LOWRY比色法與酚試劑法在原理上的不同
    

    不同濃度 0.01 0.025 ，0.05，0.1， 0.2mol L-1尿素溶液和20mLpH6.7 檸檬酸緩沖液37培養，培養結束后濾液中被脲酶水解成的氨氮用靛酚蘭比色測定
    

    6，溶液中鈮的測定
    

    分離重量法測定鈮含量的方法，包括以下步驟： （a）將試樣置于燒杯中以硝酸、氫氟酸并加熱至試樣完全溶解，隨后加入高氯酸，持續加熱至冒高氯酸煙，以驅除試樣中所含的硅元素； （b）加入亞硫酸鈉及丹寧酸加熱煮沸使鈮水解并沉淀分離；將沉淀過濾洗滌之后，連同濾紙置于原燒杯中，加硝酸、高氯酸破壞濾紙，隨后再加入硫酸，加熱至冒煙，溶解已產生的沉淀后，再次加入亞硫酸鈉及丹寧酸加熱煮沸使鈮水解并沉淀分離，經灰化灼燒后稱量五氧化二鈮的質量； （c）根據稱量的結果計算出鈮元素的質量分數。
    

    7，舉例說明細菌分解代謝產物在細菌鑒定中的意義
    

    1、實驗原理
（1）細菌生化試驗
各種細菌所具有的酶系統不盡相同，對營養基質的分解能力也不一樣，因而代謝產物或多或少地各有區別，可供鑒別細菌之用。用生化試驗的方法檢測細菌對各種基質的代謝作用及其代謝產物，從而鑒別細菌的種屬，稱之為細菌的生化反應。
（2）糖（醇）類發酵試驗
不同的細菌含有發酵不同糖（醇）的酶，因而發酵糖（醇）的能力各不相同。其產生的代謝產物亦不相同，如有的產酸產氣，有的產酸不產氣。酸的產生可利用指示劑來判定。在配制培養基時預先加入溟甲酚紫［P HS . 2 （黃色）一6 . 8 （紫色）] ，當發酵產酸時，可使培養基由紫色變為黃色。氣體產生可由發酵管中倒置的杜氏小管中有無氣泡來證明。
（3）甲基紅（Methylred ）試驗（該試驗簡稱MR 試驗）
很多細菌，如大腸桿菌等分解葡萄糖產生丙酮酸，丙酮酸再被分解，產生甲酸、乙酸、乳酸等，使培養基的pH 降低到4 . 2 以下，這時若加甲基紅指示劑呈現紅色。因甲基紅指示劑變色范圍是pH4 . 4 （紅色）一pH6 . 2 （黃色）。若某些細菌如產氣桿菌，分解葡萄糖產生丙酮酸，但很快將丙酮酸脫梭，轉化成醇等物，則培養基的pH 仍在6 . 2 以上，故此時加入甲基紅指示劑，呈現黃色。
（4）大分子物質代謝實驗．
靛基質（口引睬）試驗
某些細菌，如大腸桿菌，能分解蛋白質中的色氨酸，產生靛基質（叫睬），靛基質與對二甲基氨基苯甲醛結合，形成玫瑰色靛基質（紅色化合物）。
硫化氫試驗
某些細菌能分解含硫的氨基酸（肌氨酸、半肌氨酸等），產生硫化氫，硫化氫與培養基中的鉛鹽或鐵鹽，形成黑色沉淀硫化鉛或硫化鐵。為硫化氫試驗陽性，可借以鑒別細菌。
明膠液化實驗
某些細菌具有膠原酶，使明膠被分解，失去凝固能力，呈現液體狀態，是為陽性。淀粉水解試驗（在紫外誘變中做，本實驗不做）
細菌對大分子的淀粉不能直接利用，須靠產生的胞外酶（淀粉酶）將淀粉水解為小分子糊精或進一步水解為葡萄糖（或麥芽糖），再被細菌吸收利用，細菌水解淀粉的過程可通過底物的變化來證明，即用碘測定不再產生藍色。
（5）有機酸鹽及氨鹽利用試驗
檸檬酸鹽利用試驗
檸檬酸鹽培養基系一綜合性培養基，其中檸檬酸鈉為碳的唯一來源。而磷酸二氫按是氮的唯一來源。有的細菌如產氣桿菌，能利用檸檬酸鈉為碳源，因此能在檸檬酸鹽培養基上生長，并分解檸檬酸鹽后產生碳酸鹽，使培養基變為堿性。此時培養基中的溟廖香草酚藍指示劑由綠色變為深藍色。不能利用檸檬酸鹽為碳源的細菌，在該培養基上不生長，培養基不變色。
2、實驗儀器，材料和用具
（1）實驗儀器
37OC 恒溫培養箱、20OC 恒溫培養箱（室溫代替）。
（2）微生物材料
大腸桿菌、變形桿菌、枯草桿菌、產氣桿菌這四種菌種的斜面各1 支。
（3）試劑
甲基紅試劑、V . P 試劑、叫噪試劑、格里斯試劑（硝酸鹽利用試驗）、盧戈氏碘液（淀粉水解試驗）
（4）實驗用具
試管：每份每個試驗2 根試驗，1 根對照，8 個試驗共27 根。
無菌乎皿：每份2 個
杜氏小管：每份6 個。
接種環、酒精燈、試管架、記號筆。
（5）培養基
葡萄糖發酵培養基和乳糖發酵培養基：何份各6 支試管，何支5 一10mi 培養基，滅菌。用于糖類發酵試驗。
葡萄糖蛋白陳水培養基：每份3 支試管，何支5 一10mi 培養基，滅菌。用于甲基紅和V . P 試驗。
胰蛋白水培養基：每份3 支何支5 一10mi 培養基，滅菌。用于叫睬試驗。
檸檬酸鐵錢或醋酸鉛的半固體培養基；每份3 支，每支5 一10ml 培養基，滅菌。用于硫化氫試驗。
營養明膠培養基：每份3 支，每支．5 一10ml 培養基、滅菌。用于明膠液化試驗。
淀粉培養基：每份2 個平皿，每平皿約20ml 培養基，滅菌后倒入平皿。用于淀粉水解試驗。
檸檬酸鈉培養基：每份3 支，每支5 一IOml 培養基，滅菌，做斜面。用于檸檬酸鹽利用試驗。
3、實驗步驟
（1）糖（醇）類發酵試驗
編號在各試管上分別標明發酵培養基名稱，所接種的菌名和組號，下同。
接種取葡萄糖發酵培養基3 支，按編號1 支接種大腸桿菌，另1 支接種普通變形桿菌，第3 支不接種，作為對照C 同樣取3 支乳糖發酵培養基，1 支接種大腸桿菌，1 支接科普通變形桿菌，第3 支不接種，作為對照。
將己接種好的培養基置37OC 溫箱中培養24h 。
觀察結果：被檢細菌若能發酵培養基中的糖時，則使培養基的pH 降低，這時培養基中的指示劑呈酸性反應（為黃色），若發酵培養基中的糖產酸產氣，則培養基不僅顯酸色反應，并且在培養基中倒置的小玻璃管（杜氏小管）中有氣體。氣體占整個倒置小玻管的10 ％以上。若被檢細菌不分解培養基中的糖，則培養基不發生變化。
（2）甲基紅試驗（MR 試驗）
將大腸桿菌和產氣桿菌分別接種到葡萄糖蛋白陳水培養基中，37OC 培養48h ，加甲基紅指示劑數滴，觀察結果，呈現紅色者為陽性，呈現黃色者為陰性。
（3）伏一普二氏試驗（V . P ．試驗）
將被檢菌接種到葡萄糖蛋白陳水培養基中，37OC 培養48h ，取出，加入40 % KOlls 一10 滴，然后再加入等量的5 ％。一蔡酚溶液，用力振蕩，再放入37OC 溫箱中保溫巧一30min ，以加快反應速度。若培養物呈現紅色，為伏一普反應陽性。
（4）靛基質（口引噪）試驗將被檢菌接種到胰蛋白陳水培養基中，37OC 培養24h 一48h 后，沿試管壁滴加數滴叫睬試劑于培養物液面，觀察結果。
出現紅色者為陽性，出現黃色者為陰性。
（5）硫化氫試驗：
將大腸桿菌和變形桿菌以接種針穿刺接種到醋酸鉛或檸檬酸鐵氨培養基中，37OC 培養24h ，觀察結果，若有黑色出現者為陽性。
（6）明膠液化試驗
取大腸桿菌和枯草桿菌的純培養物少許，以接種針分別穿刺接種到營養明膠培養基中，置20OC 培養5 一7 天。觀察明膠培養基液化情況。若被檢細菌20 OC 不易生長，可放3 7 OC 培養，但在此溫度下明膠培養基呈液狀，故觀察結果時，應將明膠培養基輕輕放入4OC 冰箱30min ，此時明膠又凝固。若放置于冰箱30min 仍不凝固者，說明明膠被試驗細菌液化，是為陽性。
（7）淀粉水解試驗
將配制好的淀粉培養基冷卻到SOOC 左右，以無菌操作制成平板。
用接種環取少許枯草桿菌劃線接種在平板的一邊，再取少許大腸桿菌劃線接種在平板的另一邊。置37OC 溫箱培養24h 。
將平皿取出，打開皿蓋，滴加少量盧戈氏碘液于平板上，輕輕搖動平皿，使碘液均勻鋪滿整個平板。如菌苔周圍有無色透明圈出現，說明淀粉己被水解。透明圈的大小，說明該菌水解淀粉能力的大小。
（8）檸檬酸鹽利用試驗
取少量被檢菌接種到檸檬酸鹽培養基上，37OC 培養24h 后，觀察結果。培養基變深藍色者為陽性。培養基不變色，則繼續培養7 天，培養基仍不變色者為陰性。


其實意義不是很大，一般是根據《伯氏細菌手冊》看的，不過現在基本上都是用16S RNA來鑒定，要精確一些。 
    

    8，什么是三羥酸循環
    

    三羥酸循環：一次循環，消耗一個2碳的乙酰CoA，共釋放2分子CO2，8個H，其中四個來自乙酰CoA，另四個來自H2O，3個NADH+H+，1FADH2。此外，還生成一分子ATP。這個都只是一種說法，有些肥胖的人不是這種情況。平時吃好、睡好、多做運動，身體就會好的，不用太在意是否肥胖。
    檸檬酸循環（citric acid cycle）：也稱為三羧酸循環（tricarboxylic acid cycle，tca），krebs循環。是用于乙酰coa中的乙?；趸蒫o2的酶促反應的循環系統，該循環的第一步是由乙酰coa經草酰乙酸縮合形成檸檬酸。 乙酰coa進入由一連串反應構成的循環體系，被氧化生成h2o和co2。由于這個循環反應開始于乙酰coa與草酰乙酸(oxaloacetate)縮合生成的含有三個羧基的檸檬酸，因此稱之為三羧酸循環或檸檬酸循環(citric acid cycle)。在三羧酸循環中，檸檬酸合成酶催化的反應是關鍵步驟，草酰乙酸的供應有利于循環順利進行。 其詳細過程如下：? (1)乙酰coa進入三羧酸循環? 乙酰coa具有硫酯鍵，乙?；凶銐蚰芰颗c草酰乙酸的羧基進行醛醇型縮合。首先從ch3co基上除去一個h+，生成的陰離子對草酰乙酸的羰基碳進行親核攻擊，生成檸檬酰coa中間體，然后高能硫酯鍵水解放出游離的檸檬酸，使反應不可逆地向右進行。該反應由檸檬酸合成酶(citrate synthetase)催化，是很強的放能反應。 由草酰乙酸和乙酰coa合成檸檬酸是三羧酸循環的重要調節點，檸檬酸合成酶是一個變構酶，atp是檸檬酸合成酶的變構抑制劑，此外，α-酮戊二酸、nadh能變構抑制其活性，長鏈脂酰coa也可抑制它的活性，amp可對抗atp的抑制而起激活作用。? (2)異檸檬酸形成? 檸檬酸的叔醇基不易氧化，轉變成異檸檬酸而使叔醇變成仲醇，就易于氧化，此反應由順烏頭酸酶催化，為一可逆反應。 (3)第一次氧化脫酸? 在異檸檬酸脫氫酶作用下，異檸檬酸的仲醇氧化成羰基，生成草酰琥珀酸(oxalosuccinate)的中間產物，后者在同一酶表面，快速脫羧生成α-酮戊二酸(α?ketoglutarate)、nadh和co2，此反應為β-氧化脫羧，此酶需要mn2+作為激活劑。? 此反應是不可逆的，是三羧酸循環中的限速步驟，adp是異檸檬酸脫氫酶的激活劑，而atp，nadh是此酶的抑制劑。? (4)第二次氧化脫羧? 在α-酮戊二酸脫氫酶系作用下，α-酮戊二酸氧化脫羧生成琥珀酰coa、nadh+h+和co2，反應過程完全類似于丙酮酸脫氫酶系催化的氧化脫羧，屬于α?氧化脫羧，氧化產生的能量中一部分儲存于琥珀酰coa的高能硫酯鍵中。? α-酮戊二酸脫氫酶系也由三個酶(α-酮戊二酸脫羧酶、硫辛酸琥珀?；D移酶、二氫硫辛酸脫氫酶)和五個輔酶(tpp、硫辛酸、hscoa、nad+、fad)組成。? 此反應也是不可逆的。α-酮戊二酸脫氫酶復合體受atp、gtp、naph和琥珀酰coa抑制，但其不受磷酸化/去磷酸化的調控。? (5)底物磷酸化生成atp? 在琥珀酸硫激酶(succinate thiokinase)的作用下，琥珀酰coa的硫酯鍵水解，釋放的自由能用于合成gtp，在細菌和高等生物可直接生成atp，在哺乳動物中，先生成gtp，再生成atp，此時，琥珀酰coa生成琥珀酸和輔酶a。? (6)琥珀酸脫氫? 琥珀酸脫氫酶(succinate dehydrogenase)催化琥珀酸氧化成為延胡索酸。該酶結合在線粒體內膜上，而其他三羧酸循環的酶則都是存在線粒體基質中的，這酶含有鐵硫中心和共價結合的fad，來自琥珀酸的電子通過fad和鐵硫中心，然后進入電子傳遞鏈到o2，丙二酸是琥珀酸的類似物，是琥珀酸脫氫酶強有力的競爭性抑制物，所以可以阻斷三羧酸循環。? (7)延胡索酸的水化? 延胡索酸酶僅對延胡索酸的反式雙鍵起作用，而對順丁烯二酸(馬來酸)則無催化作用，因而是高度立體特異性的。? (8)草酰乙酸再生? 在蘋果酸脫氫酶(malic dehydrogenase)作用下，蘋果酸仲醇基脫氫氧化成羰基，生成草酰乙酸(oxalocetate)，nad+是脫氫酶的輔酶，接受氫成為nadh+h+(圖4-5)。? 三羰酸循環總結：? 乙酰 coa+3nadh++fad+gdp+pi+2h2o?—→2co2+3nadh+fadh2+gtp+3h+ +coash?? ①co2的生成，循環中有兩次脫羧基反應(反應3和反應4)兩次都同時有脫氫作用，但作用的機理不同，由異檸檬酸脫氫酶所催化的β?氧化脫羧，輔酶是nad+，它們先使底物脫氫生成草酰琥珀酸，然后在mn2+或mg2+的協同下，脫去羧基，生成α-酮戊二酸。 α-酮戊二酸脫氫酶系所催化的α?氧化脫羧反應和前述丙酮酸脫氫酶系所催經的反應基本相同。? 應當指出，通過脫羧作用生成co2，是機體內產生co2的普遍規律，由此可見，機體co2的生成與體外燃燒生成co2的過程截然不同。? ②三羧酸循環的四次脫氫，其中三對氫原子以nad+為受氫體，一對以fad為受氫體，分別還原生成nadh+h+和fadh2。它們又經線粒體內遞氫體系傳遞，最終與氧結合生成水，在此過程中釋放出來的能量使adp和pi結合生成atp，凡nadh+h+參與的遞氫體系，每2h氧化成一分子h2o，生成3分子atp，而fadh2參與的遞氫體系則生成2分子atp，再加上三羧酸循環中有一次底物磷酸化產生一分子atp，那么，一分子ch2co?scoa參與三羧酸循環，直至循環終末共生成12分子atp。? ③乙酰coa中乙?；奶荚?，乙酰coa進入循環，與四碳受體分子草酰乙酸縮合，生成六碳的檸檬酸，在三羧酸循環中有二次脫羧生成2分子co2，與進入循環的二碳乙?；奶荚訑迪嗟?，但是，以co2方式失去的碳并非來自乙?；膬蓚€碳原子，而是來自草酰乙酸。 ④三羧酸循環的中間產物，從理論上講，可以循環不消耗，但是由于循環中的某些組成成分還可參與合成其他物質，而其他物質也可不斷通過多種途徑而生成中間產物，所以說三羧酸循環組成成分處于不斷更新之中。? 例如 草楚酰乙酸——→天門冬氨酸 α－酮戊二酸——→谷氨酸 草酰乙酸——→丙酮酸——→丙氨酸 其中丙酮酸羧化酶催化的生成草酰乙酸的反應最為重要。? 因為草酰乙酸的含量多少，直接影響循環的速度，因此不斷補充草酰乙酸是使三羧酸循環得以順利進行的關鍵。? 三羧酸循環中生成 的蘋果酸和草酰乙酸也可以脫羧生成丙酮酸，再參與合成許多其他物質或進一步氧化。? (二)糖有氧氧化的生理意義 1.三羧酸循環是機體獲取能量的主要方式。1個分子葡萄糖經無氧酵解僅凈生成2個分子atp，而有氧氧化可凈生成38個atp，其中三羧酸循環生成24個atp，在一般生理條件下，許多組織細胞皆從糖的有氧氧化獲得能量。糖的有氧氧化不但釋能效率高，而且逐步釋能，并逐步儲存于atp分子中，因此能的利用率也很高。? 2.三羧酸循環是糖，脂肪和蛋白質三種主要有機物在體內徹底氧化的共同代謝途徑，三羧酸循環的起始物乙酰輔酶a，不但是糖氧化分解產物，它也可來自脂肪的甘油、脂肪酸和來自蛋白質的某些氨基酸代謝，因此三羧酸循環實際上是三種主要有機物在體內氧化供能的共同通路，估計人體內2/3的有機物是通過三羧酸循環而被分解的。? 3.三羧酸循環是體內三種主要有機物互變的聯結機構，因糖和甘油在體內代謝可生成α-酮戊二酸及草酰乙酸等三羧酸循環的中間產物，這些中間產物可以轉變成為某些氨基酸；而有些氨基酸又可通過不同途徑變成α-酮戊二酸和草酰乙酸，再經糖異生的途徑生成糖或轉變成甘油，因此三羧酸循環不僅是三種主要的有機物分解代謝的最終共同途徑，而且也是它們互變的聯絡機構。? (三)糖有氧氧化的調節? 如上所述糖有氧氧化分為兩個階段，第一階段糖酵解途徑的調節在糖酵解部分已探討過，下面主要討論第二階段丙酸酸氧化脫羧生成乙酰coa并進入三羧酸循環的一系列反應的調節。丙酮酸脫氫酶復合體、檸檬酸合成酶、異檸檬酸脫氫酶和α-酮戊二酸脫氫酶復合體是這一過程的限速酶。? 丙酮酸脫氫酶復合體受別位調控也受化學修飾調控，該酶復合體受它的催化產物atp、乙酰coa和nadh有力的抑制，這種別位抑制可被長鏈脂肪酸所增強，當進入三羧酸循環的乙酰coa減少，而amp、輔酶a和nad+堆積，酶復合體就被別位激活，除上述別位調節，在脊椎動物還有第二層次的調節，即酶蛋白的化學修飾，pdh含有兩個亞基，其中一個亞基上特定的一個絲氨酸殘基經磷酸化后，酶活性就受抑制，脫磷酸化活性就恢復，磷酸化-脫磷酸化作用是由特異的磷酸激酶和磷酸蛋白磷酸酶分別催化的，它們實際上也是丙酮酸酶復合體的組成，即前已述及的調節蛋白，激酶受atp別位激活，當atp高時，pdh就磷酸化而被激活，當atp濃度下降，激酶活性也降低，而磷酸酶除去pdh上磷酸，pdh又被激活了。? 對三羧酸循環中檸檬酸合成酶、異檸檬酸脫氫酶和α-酮戊二酸脫氫酶的調節，主要通過產物的反饋抑制來實現的，而三羧酸循環是機體產能的主要方式。因此atp/adp與nadh/nad+兩者的比值是其主要調節物。atp/adp比值升高，抑制檸檬酸合成酶和異檸檬酶脫氫酶活性，反之atp/adp比值下降可激活上述兩個酶。nadh/nad+比值升高抑制檸檬酸合成酶和α－酮戊二酸脫氫酶活性，除上述atp/adp與nadh/nad+之外其它一些代謝產物對酶的活性也有影響，如檸檬酸抑制檸檬酸合成酶活性，而琥珀酰coa抑制α-酮戊二酸脫氫酶活性?？傊?，組織中代謝產物決定循環反應的速度，以便調節機體atp和nadh濃度，保證機體能量供給。?
    

    9，請幫忙解釋一下三羧酸循環 關鍵是第二步驟
    

    三羧酸循環(tricarboxylic acid cycle)　　由乙酰CoA和草酰乙酸縮合成有三個羧基的檸檬酸, 檸檬酸經一系列反應, 一再氧化脫羧, 經α酮戊二酸、 琥珀酸, 再降解成草酰乙酸。而參與這一循環的丙酮酸的三個碳原子, 每循環一次, 僅用去一分子乙?；械亩紗挝? 最后生成兩分子的CO2 , 并釋放出大量的能量?！　幟仕嵫h（Citric acid cycle）：也稱為三羧酸循環（tricarboxylic acid cycle，TCA），Krebs循環。是用于乙酰CoA中的乙?；趸蒀O2的酶促反應的循環系統，該循環的第一步是由乙酰CoA與草酰乙酸縮合形成檸檬酸?！　。ㄒ唬┤人嵫h的過程　　乙酰CoA進入由一連串反應構成的循環體系，被氧化生成H2O和CO2。由于這個循環反應開始于乙酰CoA與草酰乙酸(oxaloacetic acid)縮合生成的含有三個羧基的檸檬酸，因此稱之為三羧酸循環或檸檬酸循環(citrate cycle)。在三羧酸循環中，檸檬酸合成酶催化的反應是關鍵步驟，草酰乙酸的供應有利于循環順利進行。 其詳細過程如下：? 　　(1)乙酰-CoA進入三羧酸循環　　乙酰CoA具有硫酯鍵，乙?；凶銐蚰芰颗c草酰乙酸的羧基進行醛醇型縮合。首先檸檬酸合酶的組氨酸殘基作為堿基與乙酰CoA作用，使乙酰CoA的甲基上失去一個h+，生成的碳陰離子對草酰乙酸的羰基碳進行親核攻擊，生成檸檬酰CoA中間體，然后高能硫酯鍵水解放出游離的檸檬酸，使反應不可逆地向右進行。該反應由檸檬酸合成酶(citrate synthase)催化，是很強的放能反應。 　　由草酰乙酸和乙酰CoA合成檸檬酸是三羧酸循環的重要調節點，檸檬酸合成酶是一個變構酶，ATP是檸檬酸合成酶的變構抑制劑，此外，α-酮戊二酸、NADH能變構抑制其活性，長鏈脂酰CoA也可抑制它的活性，AMP可對抗ATP的抑制而起激活作用?！　?2)異檸檬酸形成　　檸檬酸的叔醇基不易氧化，轉變成異檸檬酸而使叔醇變成仲醇，就易于氧化，此反應由順烏頭酸酶催化，為一可逆反應?！　?3)第一次氧化脫羧　　在異檸檬酸脫氫酶作用下，異檸檬酸的仲醇氧化成羰基，生成草酰琥珀酸(oxalosuccinic acid)的中間產物，后者在同一酶表面，快速脫羧生成α-酮戊二酸(α?ketoglutarate)、NADH和co2，此反應為β-氧化脫羧，此酶需要Mg2+作為激活劑?！　〈朔磻遣豢赡娴?，是三羧酸循環中的限速步驟，ADP是異檸檬酸脫氫酶的激活劑，而ATP，NADH是此酶的抑制劑?！　?4)第二次氧化脫羧　　在α-酮戊二酸脫氫酶系作用下，α-酮戊二酸氧化脫羧生成琥珀酰CoA、NADH·H+和CO2，反應過程完全類似于丙酮酸脫氫酶系催化的氧化脫羧，屬于α?氧化脫羧，氧化產生的能量中一部分儲存于琥珀酰CoA的高能硫酯鍵中?！　ˇ?酮戊二酸脫氫酶系也由三個酶(α-酮戊二酸脫羧酶、硫辛酸琥珀?；D移酶、二氫硫辛酸脫氫酶)和五個輔酶(tpp、硫辛酸、hscoa、NAD+、FAD)組成?！　〈朔磻彩遣豢赡娴?。α-酮戊二酸脫氫酶復合體受ATP、GTP、NADH和琥珀酰CoA抑制，但其不受磷酸化/去磷酸化的調控?！　?5)底物磷酸化生成ATP　　在琥珀酸硫激酶(succinate thiokinase)的作用下，琥珀酰CoA的硫酯鍵水解，釋放的自由能用于合成GTP，在細菌和高等生物可直接生成ATP，在哺乳動物中，先生成GTP，再生成ATP，此時，琥珀酰CoA生成琥珀酸和輔酶A?！　?6)琥珀酸脫氫　　琥珀酸脫氫酶(succinate dehydrogenase)催化琥珀酸氧化成為延胡索酸。該酶結合在線粒體內膜上，而其他三羧酸循環的酶則都是存在線粒體基質中的，這酶含有鐵硫中心和共價結合的FAD，來自琥珀酸的電子通過FAD和鐵硫中心，然后進入電子傳遞鏈到O2，丙二酸是琥珀酸的類似物，是琥珀酸脫氫酶強有力的競爭性抑制物，所以可以阻斷三羧酸循環?！　?7)延胡索酸的水化　　延胡索酸酶僅對延胡索酸的反式雙鍵起作用，而對順丁烯二酸(馬來酸)則無催化作用，因而是高度立體特異性的?！　?8)草酰乙酸再生　　在蘋果酸脫氫酶(malic dehydrogenase)作用下，蘋果酸仲醇基脫氫氧化成羰基，生成草酰乙酸(oxalocetate)，NAD+是脫氫酶的輔酶，接受氫成為NADH·H+(圖4-5)?！　∪仕嵫h總結：　　乙酰CoA+3NAD++FAD+GDP+Pi—→2CO2+3NADH+FADH2+GTP+2H+ +CoA-SH　?、貱O2的生成，循環中有兩次脫羧基反應(反應3和反應4)兩次都同時有脫氫作用，但作用的機理不同，由異檸檬酸脫氫酶所催化的β?氧化脫羧，輔酶是NAD+，它們先使底物脫氫生成草酰琥珀酸，然后在Mn2+或Mg2+的協同下，脫去羧基，生成α-酮戊二酸?！　ˇ?酮戊二酸脫氫酶系所催化的α?氧化脫羧反應和前述丙酮酸脫氫酶系所催經的反應基本相同?！　斨赋?，通過脫羧作用生成CO2，是機體內產生CO2的普遍規律，由此可見，機體CO2的生成與體外燃燒生成CO2的過程截然不同?！　、谌人嵫h的四次脫氫，其中三對氫原子以NAD+為受氫體，一對以FAD為受氫體，分別還原生成NADH+H+和FADH2。它們又經線粒體內遞氫體系傳遞，最終與氧結合生成水，在此過程中釋放出來的能量使adp和pi結合生成ATP，凡NADH+H+參與的遞氫體系，每2H氧化成一分子H2O，每分子NADH最終產生3分子ATP，而FADH2參與的遞氫體系則生成2分子ATP，再加上三羧酸循環中有一次底物磷酸化產生一分子ATP，那么，一分子檸檬酸參與三羧酸循環，直至循環終末共生成12分子ATP?！　、垡阴oA中乙?；奶荚?，乙酰CoA進入循環，與四碳受體分子草酰乙酸縮合，生成六碳的檸檬酸，在三羧酸循環中有二次脫羧生成2分子CO2，與進入循環的二碳乙?；奶荚訑迪嗟?，但是，以CO2方式失去的碳并非來自乙?；膬蓚€碳原子，而是來自草酰乙酸?！　、苋人嵫h的中間產物，從理論上講，可以循環不消耗，但是由于循環中的某些組成成分還可參與合成其他物質，而其他物質也可不斷通過多種途徑而生成中間產物，所以說三羧酸循環組成成分處于不斷更新之中?！　±?草酰乙酸——→天門冬氨酸　　α－酮戊二酸——→谷氨酸　　草酰乙酸——→丙酮酸——→丙氨酸　　其中丙酮酸羧化酶催化的生成草酰乙酸的反應最為重要?！　∫驗椴蒗Ｒ宜岬暮慷嗌?，直接影響循環的速度，因此不斷補充草酰乙酸是使三羧酸循環得以順利進行的關鍵?！　∪人嵫h中生成 的蘋果酸和草酰乙酸也可以脫羧生成丙酮酸，再參與合成許多其他物質或進一步氧化?！　∪人嵫h的化學歷程：　?。?）檸檬酸生成階段 乙酰CoA不能直接被氧化分解，必須改變其分子結構才有可能。乙酰CoA和草酰乙酸在檸檬酸合成酶催化下，弄成檸檬酰CoA，加水生成檸檬酸并放出CoA－SH?！　。?）氧化脫羧階段 這個階段包括4個反應，即異檸檬酸的形成、憤檸檬酸的氧化脫羧、α－酮戊二酸氧化和琥珀酸生成，此階段釋放CO2并合成ATP?！　。?）草酰乙酸的再生階段 通過上述兩個階段的反應，乙酰CoA的兩個碳以CO2形式釋放了，四碳的草酰乙酸轉變成四碳琥珀酸。 保證后續的乙酰CoA級繼續被氧化脫羧，琥珀酸經過延胡索酸和蘋果酸生成，最后生成草酰乙酸?！　?二)三羧酸循環的生理意義　　1.三羧酸循環是機體獲取能量的主要方式。1個分子葡萄糖經無氧酵解僅凈生成2個分子ATP，而有氧氧化可凈生成32個ATP，其中三羧酸循環生成20個ATP，在一般生理條件下，許多組織細胞皆從糖的有氧氧化獲得能量。糖的有氧氧化不但釋能效率高，而且逐步釋能，并逐步儲存于ATP分子中，因此能的利用率也很高?！　?.三羧酸循環是糖，脂肪和蛋白質三種主要有機物在體內徹底氧化的共同代謝途徑，三羧酸循環的起始物乙酰CoA，不但是糖氧化分解產物，它也可來自脂肪的甘油、脂肪酸和來自蛋白質的某些氨基酸代謝，因此三羧酸循環實際上是三種主要有機物在體內氧化供能的共同通路，估計人體內2/3的有機物是通過三羧酸循環而被分解的?！　?.三羧酸循環是體內三種主要有機物互變的聯結機構，因糖和甘油在體內代謝可生成α-酮戊二酸及草酰乙酸等三羧酸循環的中間產物，這些中間產物可以轉變成為某些氨基酸；而有些氨基酸又可通過不同途徑變成α-酮戊二酸和草酰乙酸，再經糖異生的途徑生成糖或轉變成甘油，因此三羧酸循環不僅是三種主要的有機物分解代謝的最終共同途徑，而且也是它們互變的聯絡機構?！　?三)三羧酸循環的調節　　如上所述糖有氧氧化分為兩個階段，第一階段糖酵解途徑的調節在糖酵解部分已探討過，下面主要討論第二階段丙酸酸氧化脫羧生成乙酰CoA并進入三羧酸循環的一系列反應的調節。丙酮酸脫氫酶復合體、檸檬酸合成酶、異檸檬酸脫氫酶和α-酮戊二酸脫氫酶復合體是這一過程的限速酶?！　”崦摎涿笍秃象w受別構調控也受化學修飾調控，該酶復合體受它的催化產物ATP、乙酰CoA和NADH有力的抑制，這種別構抑制可被長鏈脂肪酸所增強，當進入三羧酸循環的乙酰CoA減少，而AMP、CoA和NAD+堆積，酶復合體就被別構激活，除上述別位調節，在脊椎動物還有第二層次的調節，即酶蛋白的化學修飾，PDH含有兩個亞基，其中一個亞基上特定的一個絲氨酸殘基經磷酸化后，酶活性就受抑制，脫磷酸化活性就恢復，磷酸化-脫磷酸化作用是由特異的磷酸激酶和磷酸蛋白磷酸酶分別催化的，它們實際上也是丙酮酸酶復合體的組成，即前已述及的調節蛋白，激酶受ATP別構激活，當ATP高時，PDH就磷酸化而被激活，當ATP濃度下降，激酶活性也降低，而磷酸酶除去PDH上磷酸，PDH又被激活了?！　θ人嵫h中檸檬酸合成酶、異檸檬酸脫氫酶和α-酮戊二酸脫氫酶的調節，主要通過產物的反饋抑制來實現的，而三羧酸循環是機體產能的主要方式。因此ATP/ADP與NADH/NAD+兩者的比值是其主要調節物。ATP/ADP比值升高，抑制檸檬酸合成酶和異檸檬酶脫氫酶活性，反之ATP/ADP比值下降可激活上述兩個酶。NADH/NAD+比值升高抑制檸檬酸合成酶和α－酮戊二酸脫氫酶活性，除上述ATP/ADP與NADH/NAD+之外其它一些代謝產物對酶的活性也有影響，如檸檬酸抑制檸檬酸合成酶活性，而琥珀酰-CoA抑制α-酮戊二酸脫氫酶活性?？傊?，組織中代謝產物決定循環反應的速度，以便調節機體ATP和NADH濃度，保證機體能量供給。
    




            
    

            
    
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